HPLC法测定大鼠脑组织磷酸二酯酶活性

摘要：

目的建立大鼠脑组织磷酸二酯酶(PDE)活性测定的HPLC法.方法大鼠脑组织匀浆后,可溶部分为酶样品,以cAMP和cGMP为反应底物,采用双管法测定.色谱柱为Nova-Pak C1s(3.9 mm×150mm,4μm);流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(10:90,V/V);流速为0.8 mL·min-1;检测波长254 nm.结果 PDE底物(cAMP、cGMP)和系列产物(5'AMP、5'GMP、腺苷、次黄嘌呤和腺嘌呤)分离良好,无干扰.cAMP和cGMP检测限分别为0.125μmoL·L-1和0.062 5 μmoL·L-1;平均回收率91.2%～102.8%;日内及日RSRSD均<10%.大鼠脑组织PDE活性为(364.660 1±66.686 2)nmol·g-1·min-1(n=6).结论本法能准确测定大鼠脑组织的PDE活性,方法简便、灵敏.

关键词：磷酸二酯酶、高效液相色谱法、大鼠

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分类号：R927.2(药典、药方集（处方集）、药物鉴定)

资助基金：中国科学院资助项目30370510;30170337;广东省博士启动基金31693;卫生部临床学科重点项目2001321;CMB基金98-667;教育部高校骨干教师资助计划082004;广东省医学科研项目B2002124

在线出版日期：2006-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：348-350