10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.18.011
吴茱萸碱介导线粒体凋亡途径保护H2O2所致L-O2肝细胞损伤
目的 探究吴茱萸碱对过氧化氢(H2O2)所致L-O2肝细胞损伤的保护作用及其作用机制.方法 将L-O2肝细胞分为对照组、H2O2组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组;对照组细胞为正常培养的L-O2细胞,H2O2组细胞用120μmol·L-1的H2O2处理细胞6 h,低、中、高剂量实验组细胞分别用4、8和16μmol·L-1的吴茱萸碱处理细胞24 h后,再用120 μmol·L-1的H2O2继续处理细胞6 h.用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞存活率,用流式细胞术法检测各组细胞凋亡情况,用JC-1染色法检测各组细胞线粒体膜电位,用化学发光仪检测三磷酸腺苷(ATP)水平,用蛋白质印迹法检测各组细胞相关蛋白表达水平.结果 对照组、H2O2组、高剂量实验组细胞存活率分别为(100.00±3.92)%、(64.09±2.69)%和(94.89±5.78)%,细胞凋亡率分别为(3.05±0.27)%、(19.75±1.47)%和(5.58±0.34)%,JC-1 红/绿荧光比值分别为2.55±0.37、0.55±0.03和2.11±0.11,裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cl Caspase-3)蛋白表达水平分别为 0.34±0.02、1.07±0.05 和0.40±0.04,细胞色素(Cyt C)蛋白表达水平分别为0.30±0.02、0.91±0.09和0.35±0.03,磷酸化C-Jun氨基端激酶(p-JNK)蛋白表达水平分别为0.32±0.03、1.04±0.04和0.52±0.05,线粒体裂变因子(Mff)蛋白表达水平分别为0.31±0.04、0.94±0.15和0.45±0.05.以上指标,H2O2组与对照组比较,高剂量实验组与H2O2组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 吴茱萸碱预处理可通过改变线粒体膜电位介导线粒体凋亡途径,抑制细胞凋亡,从而减轻H2O2所致的L-O2肝细胞损伤,这可能与JNK/Mff通路有关.
吴茱萸碱、过氧化氢、肝损伤、线粒体凋亡、C-Jun氨基端激酶/线粒体裂变因子通路
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R285(中药学)
宁波市鄞州区农业与社会发展科技基金资助项目20191YZQ010017
2023-10-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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