miR-34a在流体剪切力诱导软骨细胞损伤过程中的作用

摘要：

目的 探讨miR-34a在流体剪切力诱导软骨细胞损伤过程中的作用.方法 用24 dyne·cm-2 剪切力作用 ATDC5 软骨细胞 0、10、20、40、60、120 和240 min,用噻唑蓝法检测细胞存活率,用流式细胞术检测细胞内Ca2+水平.将细胞分为对照组(0 dyne·cm-2/1 h)和实验组(24 dyne·cm-2/1 h),用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-34a的表达水平.将细胞分为对照+si-NC组(0 dyne·cm-2/1 h)、对照+si-anti-miR-34a组(0 dyne·cm-2/1 h)、实验+si-NC组(24 dyne·cm-2/1 h)、实验+si-anti-miR-34a组(24 dyne·cm-2/1h),用酶联免疫吸附试验法检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,用TUNEL染色检测细胞凋亡,用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达水平.结果 时间梯度剪切力作用能明显抑制ATDC5 软骨细胞活性,增加细胞内 Ca2+水平.24 dyne·cm-2 剪切力作用 1h,对照组和实验组的miR-34a相对表达水平分别为 1.02±0.74 和 3.23±0.28,差异有统计学意义(P＜0.05).对照+si-NC组、对照+si-anti-miR-34a组、实验+si-NC组和实验+si-anti-miR-34a 组的 IL-6 含量分别为(20.18±1.34)、(22.34±1.74)、(35.26±1.02)和(24.96±1.35)pg·mL-1,TNF-α含量分别为(30.76±1.96)、(29.72±1.28)、(51.78±1.27)和(38.83±1.95)pg·mL-1,TUNEL染色阳性细胞数分别为(3.40±0.55)、(3.60±0.54)、(60.60±1.34)和(19.10±1.11)个,p53 蛋白相对表达水平分别为 0.51±0.03、0.50±0.06、1.23±0.04和 0.54±0.05,胱天蛋白酶-3 蛋白相对表达水平分别为1.10±0.05、1.12±0.05、2.05±0.04 和 0.84±0.05,B淋巴细胞瘤-2 相关X蛋白/B淋巴细胞瘤-2(Bax/Bcl-2)比值分别为 0.16±0.01、0.14±0.03、0.73±0.04和0.12±0.05.对照+si-NC组的上述指标和实验+si-NC组比较,实验+si-NC组的上述指标与实验+si-anti-miR-34a组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 miR-34a具有降低细胞活力,提高炎症因子和细胞内Ca2+水平,从而促软骨细胞凋亡的作用.

关键词：miR-34a、流体剪切力、Ca2+水平、炎症因子、软骨细胞凋亡

所属期刊栏目：39

分类号：R97(药品)

资助基金：山西省基础研究计划青年科学研究基金资助项目20210302124624

在线出版日期：2023-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2507-2511