蟾毒灵通过抑制乏氧状态下的乳酸生成调节M2型巨噬细胞极化逆转结肠癌耐药

摘要：

目的 探讨蟾毒灵(Bu)抑制乏氧状态下乳酸生成调节M2 型巨噬细胞极化逆转结肠癌耐药的作用.方法 ①将HCT116 细胞分为常氧组(HCT116N)、乏氧组(HCT116H)和乏氧+BU组(HCT116H+BU),常氧组给予RPMI1640 培养基进行培养,乏氧组给予含200 μmol·L-1 CoCl2的RPMI1640 培养基进行培养,乏氧+BU组给予含 25 nmol·L-1 BU 的RPMI1640 培养基(含 200 μmol·L-1 CoCl2)进行培养.②用佛波酯(200 ng·mL-1)将THP-1 诱导48h后成为M0巨噬细胞;将M0 巨噬细胞分为空白组(M0)、常氧对照组(HCT116N-Mφ)、乏氧模型组(HCT116H-Mφ)、乏氧+乳酸抑制剂(Lactate inhibitor)实验组(HCT116H+Lactate inhibitor-Mφ)、乏氧+BU实验组(HCT116H+BU-Mφ),空白组不作处理,常氧对照组给予HCT116N条件培养基培养96 h,乏氧模型组给予HCT116H条件培养基培养96 h,乏氧+乳酸抑制剂实验组给予HCT116H条件培养基+10 μmol·L-1 Lactate inhibitor培养96 h,乏氧+BU实验组给予HCT116H+BU细胞条件培养基培养96 h.HCT116 细胞分别用 1640 培养基及前述各组共培养后的细胞条件培养基配制的不同浓度梯度(0、12.5、25、50 和 100 μmol·L-1)奥沙利铂(OXA)培养48 h.通过流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应、酶联免疫吸附法等实验观察M2 型巨噬细胞极化状态,细胞计数试剂盒-8 法观察极化后的巨噬细胞对耐药的影响.结果 常氧对照组、乏氧模型组的 CD11b+CD206+比例分别为(26.83±4.14)%和(38.70±3.40)%,白细胞介素-10(IL-10)表达量分别为(108.00±9.17)和(188.33±8.50)pg·mL-1,转化生长因子β(TGF-β)表达量分别为(180.67±10.07)和(261.67±10.41)pg·mL-1,并且乏氧诱导M2 型巨噬细胞极化后促进结肠癌细胞耐药;乏氧+乳酸抑制剂实验组和乏氧模型组 IL10 表达量分别为(100.33±8.62)和(196.00±8.54)pg·mL-1,TGF-β表达量分别为(137.33±10.26)和(224.00±6.56)pg·mL-1,并且乳酸诱导M2 型巨噬细胞极化后对OXA的敏感性降低;乏氧+BU实验组和乏氧模型组的 CD11b+CD206+比例分别为(18.78±1.58)%和(34.49±5.07)%,IL-10 表达量分别为(89.67±9.61)和(177.00±10.44)pg·mL-1,TGF-β表达量分别为(140.33±10.02)和(224.33±15.04)pg·mL-1,并且Bu抑制M2 型巨噬细胞极化后结肠癌细胞增强对OXA的敏感性;乏氧组和乏氧+BU 组的乳酸表达量分别为(32.00±6.00)和(59.67±7.51)mmol·L-1.上述指标,组间比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 乏氧结肠癌细胞来源的乳酸可增强M2 型巨噬细胞极化促进结肠癌耐药,而蟾毒灵可抑制乏氧下乳酸生成调节M2 型巨噬细胞极化进而逆转结肠癌耐药.

关键词：蟾毒灵、乏氧、结肠癌、M2型巨噬细胞、耐药、乳酸

所属期刊栏目：39

分类号：R28(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;上海市启明星基金资助项目;上海市普陀区中心医院科研项目

在线出版日期：2023-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2492-2496