微小RNA-29a对心肌细胞缺血再灌注损伤作用及机制

摘要：

目的 探讨微小核RNA -29a(miR -29a)在缺血再灌注引起的心肌细胞损伤中的功能和分子机制.方法 体外培养H9c2 大鼠心肌细胞,并将其分为正常对照组(正常培养的H9c2 细胞)、缺氧再灌注(H/R)组(缺氧处理4 h,继而复氧4 h)、H/R +miR -29a inhibitor 组(在H/R 组基础上转染miR -29a 抑制剂)、H/R +miR -29a inhibitor +LY294002 组(在H/R +miR -29a inhibitor 组基础上加用2 μg·mL -1 抑制剂LY294002).通过实时荧光定量聚合酶链反应检测miR -29a 和磷脂酰肌醇-3 -羟激酶(PI3K)的表达水平;使用细胞计数试剂盒8 (CCK -8)试剂盒检测细胞活力;通过流式细胞术和原位末端标记(TUNEL)实验检测细胞凋亡;使用试剂盒检测乳酸盐脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;通过双荧光素酶报告实验验证miR -29a 和PI3K 的靶向关系.结果 对照组、H/R 组和H/R +miR -29a inhibitor 组细胞miR -29a 表达水平分别为1.05 ±0.02、4.13 ±0.15、1.56 ±0.21,细胞活力分别为(100.00 ±0.08)％、(50.02 ±0.13 )％ 和(83.65 ±0.04 )％,CK 含量分别为(71.46 ±0.08 )、(140.22 ±0.14)和(98.86 ±0.25)U·L -1 ,NC 组上述指标和H/R +miR -29a inhibitor组与H/R 组比较,差异均有统计学意义(P <0.05,P <0.01).H/R + miR -29a inhibitor 组中磷酸化p -PI3K 蛋白(0.73 ±0.09)和磷酸化蛋白激酶B(p -AKT)蛋白表达(0.82 ±0.04)显著高于H/R 组中p -PI3K 蛋白(0.29 ±0.09)和p -AKT 蛋白表达(0.39 ±0.24),差异均有统计学意义(均P <0.01),在加入PI3K/AKT 信号通路抑制剂LY294002 后p -PI3K 和p -AKT 的表达水平下调.结论 miR -29a 可促进心肌细胞凋亡,敲降miR -29a 可以保护心肌细胞免受H/R 损伤,miR -29a对H/R 心肌细胞的保护作用是通过激活 PI3K/AKT 通路实现的.

关键词：微小RNA-29a、磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B信号通路、心肌缺血再灌注损伤

所属期刊栏目：39

分类号：R97(药品)

资助基金：云南省科技计划基金资助项目202201AT070277

在线出版日期：2023-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2477-2481