10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.03.020
N6-甲基腺苷甲基化对结直肠癌细胞中程序性死亡配体1表达的影响
目的 探究N6-甲基腺苷(m6A)甲基化水平对程序性死亡配体1(PD-L1)表达和结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 用m6A RNA甲基化检测试剂盒检测人结直肠癌细胞系(HTC116、SW480、DLD1、SW260)和人正常结直肠细胞系(FHC、NCM460)的总体甲基化水平.将m6 A总体甲基化水平最高的HTC116细胞作为研究对象,以YTHDF2为靶标,分为si-control组和si-YTHDF2组分别进行干扰处置.用实时荧光定量聚合酶链反应检测阅读蛋白YTHDF2 mRNA的表达水平,用甲基化RNA免疫共沉淀结合聚合酶链反应技术检测PD-L1的甲基化水平,用蛋白质印迹法检测PD-L1蛋白的表达水平,用CCK-8实验检测细胞增殖能力.结果 人结肠癌细胞系HTC116、SW480、DLD1和SW620的总体m6 A甲基化水平分别为0.38±0.02,0.24±0.01,0.25±0.02和0.32±0.03,人正常结肠细胞FHC和NCM460的总体m6 A甲基化水平分别为0.12±0.02和0.16±0.02.4种结肠癌细胞系的总体m6 A甲基化水平均明显高于2种正常结肠细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05).si-control组和si-YTHDF2组的YTHDF2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.03和0.44±0.03,PD-L1 mRNA m6 A甲基化水平相对值分别为1.00±0.03和0.35±0.01,PD-L1蛋白相对表达水平分别为1.00±0.02和2.52±0.02,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 PD-L1在结直肠癌细胞中存在m6A修饰,且YTHDF2可抑制其在结直肠癌细胞中的m6 A甲基化水平,并上调其表达量.
N6-甲基腺苷甲基化、结直肠癌、阅读蛋白、程序性死亡配体1
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R97(药品)
2023-02-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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