10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.24.017
miR-26a-1-3p调控XIAP促进滋养层细胞凋亡而引起复发性流产的研究
目的 探讨miR-26a-1-3p通过调节滋养层细胞凋亡引发复发性流产的分子调控机制.方法 体外培养人正常绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo,并将细胞随机分为miR-NC mimic组(转染miR-NC mimic)、miR-26a-1-3p mimic组(转染miR-26a-1-3p mimic)、miR-26a-1-3p mimic+pcDNA-NC组(转染miR-26a-1-3p mimic、pcDNA-NC)、miR-26a-1-3p mimic+pcDNA-XIAP组(转染miR-26a-1-3p mimic、pcDNA-XIAP).用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;用蛋白质印迹(Western blot)法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶-3(Cl-caspaes-3)、裂解的胱天蛋白酶-9(Cl-caspaes-9)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP);用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-26a-1-3p表达水平;用Tran-swell小室实验检测各组细胞侵袭能力;用双荧光素酶报告基因实验检测miR-26a-1-3p与XIAP靶向结合.结果 miR-NC mimic组、miR-26a-1-3p mimic组、miR-26a-1-3p mimic+pcDNA-NC组、miR-26a-1-3p mimic+pcDNA-XIAP组的细胞凋亡率分别为(4.97±0.40)%,(16.52±1.08)%,(16.67±1.88)%,(5.99±0.40)%;Bax蛋白表达水平分别为0.34±0.03,0.82±0.11,0.87±0.08,0.37±0.06;Cl-caspaes-3蛋白表达水平分别为0.31±0.02,0.91±0.11,1.01±0.07,0.42±0.04;Cl-caspaes-9蛋白表达水平分别为0.31±0.02,0.91±0.11,0.88±0.08,0.45±0.05;Bcl-2蛋白表达水平分别为0.84±0.06,0.42±0.05,0.43±0.06,0.80±0.08;细胞侵袭数目分别为(100.83±8.35),(46.17±3.39),(47.50±5.28),(84.67±8.22)个.以上指标,miR-NC mimic组与miR-26a-1-3p mimic组相比、miR-26a-1-3p mimic+pcDNA-NC组与miR-26a-1-3p mimic+pcDNA-XIAP组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).双荧光素酶报告基因结果证实miR-26a-1-3p与XIAP靶向结合.结论 miR-26a-1-3p可通过调控XIAP的表达加速滋养层细胞凋亡、抑制侵袭而引发复发性流产.
复发性流产、微小RNA-26a-1-3p、滋养层细胞、凋亡
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R97(药品)
浙江省医药卫生科技计划基金资助项目2020RC145
2022-12-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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