10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.23.011
miR-489通过靶向twist1调控卵巢癌细胞顺铂耐药的研究
目的 探究miR-489调控卵巢癌细胞顺铂耐药性的可能机制.方法 A2780细胞分为inhibitor-control组、inhibitor组、inhibitor+si-NC组、in-hibitor+si-twist1组,ARCP细胞分为mimic-control组、mimic组.inhibitor-control组细胞转染miR-489抑制剂的阴性对照,inhibitor组细胞转染miR-489抑制剂,inhibitor+si-NC组细胞转染miR-489抑制剂和twist1小干扰RNA的阴性对照,inhibitor+si-twist1组细胞转染miR-489抑制剂和twist1小干扰RNA,mimic-control组细胞转染miR-489模拟物的阴性对照,mimic组细胞转染miR-489模拟物.以逆转录聚合酶链反应检测miR-489和twist1 mRNA的表达,以细胞计数法-8检测细胞活力,以蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶-3(caspase-3)、裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)和twist1蛋白表达.用生物信息学与双荧光素酶报告基因实验分析miR-489和twist1的靶向关系.结果 inhibitor-control组、inhibitor组、mimic-control组、mimic组中miR-489表达量分别为2.16±0.27,0.93±0.10,0.96±0.20,2.15±0.26,细胞活力分别为(42.70±2.99)%,(68.45±6.20)%,(73.44±5.05)%,(39.83±5.10)%,cleaved caspase-3蛋白表达量分别为0.57±0.04,0.30±0.03,0.19±0.03,0.48±0.05,以上数据,inhibitor组与inhibitor-control组相比,mimic组与mimic-control组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).inhibitor-control组、inhibitor+si-NC组和inhibitor+si-twist1组中twist1 mRNA表达量分别为0.96±0.17,2.75±0.29,1.05±0.18,细胞活力分别为(40.90±3.28)%,(74.34±5.01)%,(44.60±3.02)%,cleaved caspase-3表达量分别为0.58±0.06,0.23±0.03,0.51±0.03.inhibitor+si-NC组的上述指标与inhibitor-control组相比,inhibitor+si-twist1组的上述指标与inhibitor+si-NC组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).卵巢癌组织中miR-489与twist1的表达呈负相关,且miR-489靶向调控twist1的表达.结论 miR-489可调控卵巢癌细胞的顺铂耐药,其可能的机制是miR-489与twist1的3′UTR结合抑制其表达而降低癌细胞对顺铂的耐药.
微小RNA-489(miR-489)、卵巢癌、顺铂
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R97(药品)
湖南省教育厅基金资助项目18B533
2022-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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