结肠癌细胞调节M2型巨噬细胞极化促进化疗耐药的研究

摘要：

目的 探讨结肠癌细胞调节M2型巨噬细胞极化促进化疗耐药的作用.方法 用收集的结肠癌细胞系HCT116细胞和HCT8细胞上清液,培养由人源单核细胞系THP-1诱导的M0巨噬细胞96 h,对其细胞形态进行记录;用流式细胞术检测其M2型巨噬细胞极化标志因子组CD11 b+CD206+的表达;用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)法检测M2型巨噬细胞极化标志因子的表达.用细胞计数法-8(CCK-8)检测M2型巨噬细胞条件培养基处理后结肠癌细胞对奥沙利铂的耐药性变化.结果 通过形态学观察发现悬浮细胞THP-1细胞经PMA诱导后变为贴壁的M0巨噬细胞,呈圆饼状,用结肠癌细胞条件培养基刺激M0巨噬细胞后,细胞呈双极形态,变为长条梭形细胞.流式细胞术结果表明,HCT116、HCT8细胞上清液中CD11b+CD206+表达水平分别为42.63±0.38和40.27±2.60,明显高于M0组12.33±0.64和11.90±0.95,差异均有统计意义(均P<0.01).HCT116、HCT8细胞上清组M2型巨噬细胞标志物IL-10 mRNA表达水平分别为11.29±0.86,13.64±1.20,TGF-βmRNA表达水平分别为3.38±0.23,2.88±0.13,与M0组(1.00)相比,差异均有统计意义(均P<0.01).ELISA实验结果显示,HCT116、HCT8细胞上清刺激后的巨噬细胞上清中M2型巨噬细胞标志物IL-10表达水平分别为(10.69±0.06),(11.59±0.03)pg·mL-1,明显高于M0组(5.03±0.03),(5.78±0.07)pg·mL-1,而TGF-β表达水平分别为(26.63±0.52),(31.60±1.38)pg·mL-1,明显高于M0组(17.23±0.29),(21.63±0.11)pg·mL-1,差异均有统计意义(P<0.01或P<0.05).CCK-8实验结果显示,M2型巨噬细胞条件培养基处理的HCT116、HCT8细胞对于化疗药物奥沙利铂的IC50分别为(82.72±4.80)和(309.69±7.62)μmol·L-1,明显高于普通培养的HCT116(13.60±2.37)μmol·L-1、HCT8(124.70±5.48)μmol·L-1,差异均有统计意义(均P<0.01).结论 结肠癌细胞可以调节M2型巨噬细胞极化促进化疗耐药.

关键词：结肠癌、M2型巨噬细胞、化疗耐药、肿瘤微环境

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分类号：R979.1(药品)

资助基金：国家自然科学基金;上海市普陀区临床特色专病能力提升基金资助项目;上海市普陀区中心医院科研基金资助项目;上海市普陀区中心医院科研基金资助项目

在线出版日期：2022-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2564-2567