10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.09.021
LC-MS/MS法测定小鼠血浆中四氢生物蝶呤的浓度
目的 建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速可靠的测定小鼠血浆中四氢生物蝶呤(BH4)的浓度.方法 BH4通过苯甲酰氯(BC)衍生化后转化为BH4-BC,以合成BH4-BC-d5为内标,在Polar-Imidazole(2.1 mm×100 mm,2.2μm)色谱柱上进行色谱分离,以流动相15%乙腈水溶液(含10 mmol·L-1甲酸铵-0.2%甲酸)-乙腈(含0.2%甲酸)进行梯度洗脱,流速:0.35 mL·min-1;选用电喷雾离子源,正离子模式及多反应监测模式进行检测.结果 血浆中BH4的线性范围为5~200 ng·mL-1(r=0.9991),定量下限为5 ng·mL-1,线性关系良好且方法学考察均符合生物样品分析的要求,在方法学应用中发现糖尿病小鼠血浆BH4水平明显低于非糖尿病小鼠,血浆基质对于BH4测定无明显干扰.结论 本方法血浆用量少、灵敏度高,适用于小鼠血浆中BH4浓度的测定,可为BH4相关领域的未来研究发展奠定坚实的基础.
四氢生物蝶呤、高效液相色谱串联质谱法、小鼠血浆
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R979.1(药品)
国家自然科学基金81571376
2022-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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989-992,997