1,25(OH)2D3对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞功能的影响

摘要：

目的 观察1,25-双羟维生素D3(1,25(OH)2D3)通过miR-124-3p调控磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/AKT)通路对肺炎链球菌(SP)感染的肺泡上皮细胞功能的影响,探讨其作用机制.方法 体外培养肺泡上皮细胞A549,肺炎链球菌刺激后,随机分为10,20,40,80,160 ng·mL-11,25(OH)2D3组、Control组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+anti-miR-NC组、1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p组和1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p+LY294002组.以细胞计数(CCK-8)法试剂盒法、流式细胞仪检测各组细胞增殖、凋亡,以蛋白质印迹(WB)法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、PI3K/AKT通路的相关蛋白表达,以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miR-124-3p的表达.结果 10,20,40,80,160 ng·mL-11,25(OH)2D3处理A549细胞72 h,细胞活力分别为(83.20±1.92)％,(75.73±3.70)％,(64.40±5.10)％,(47.13±3.56)％,(33.93±5.27)％;细胞凋亡率分别为(8.14±0.96)％,(12.26±1.00)％,(14.37±0.88)％,(16.44±0.96)％,(18.12±1.15)％,最终选择160 ng·mL-11,25(OH)2D3进行后续实验.Control组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+anti-miR-NC和1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p组的miR-124-3p相对表达量为1.00±0.11,1.69±0.05,1.71±0.13,1.12±0.09,细胞活力分别为(100.00±9.67)％,(34.83±2.44)％,(37.70±1.50)％,(68.80±2.45)％,细胞凋亡率分别为(7.20±0.85)％,(18.59±0.82)％,(19.06±0.60)％,(13.44±2.15)％.与Control组对比,其他组miR-124-3p、细胞活力和细胞凋亡率均有统计学意义,CyclinD1、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).Control组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p组和1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p+LY294002的细胞活力分别为(100.00±9.64)％,(40.13±7.13)％,(74.40±6.54)％,(42.93±1.82)％,细胞凋亡率分别为(5.51±1.11)％,(15.90±0.24)％,(9.35±0.86)％,(14.24±0.84)％,与Control组相比,1,25(OH)2D3对肺泡上皮细胞A549的增殖、凋亡及CyclinD1、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达的作用,以及抑制下游PI3K/AKT通路的作用,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 1,25(OH)2D3通过抑制miR-124-3p负向调控PI3K/AKT通路,促进肺泡上皮细胞的增殖,并诱导凋亡.

关键词：1、25-双羟维生素D3、肺炎链球菌、增殖、凋亡

所属期刊栏目：37

分类号：R97(药品)

在线出版日期：2021-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：671-675