10.13699/j.cnki.1001-6821.2015.12.022
Toll样受体4基因干预对于溶血磷脂酸诱导的大鼠平滑肌细胞表型转化的影响
目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在溶血磷脂酸诱导的平滑肌细胞表型转化中的作用。方法建立原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞( RASMC)模型,分别用3种TLR4特异性小干扰RNA( siRNA)转染大鼠平滑肌细胞后,经过筛选TLR4-siRNA-2成为最佳RNA干扰序列。用1μmol? L-1溶血磷脂酸处理空白对照组、RASMC组、RASMC+阴性对照siRNA组、RASMC+TLR4-siRNA-2转染组4 h,镜下观察各组形态,用RT-PCR、Western法检测SMA-α及骨桥蛋白基因的表达。再用乙酰胆碱分别刺激上述溶血磷脂酸处理的各组RASMC,观察细胞形态变化并照相、用 RT -PCR 法检测 SMA -α及骨桥蛋白的表达。结果溶血磷脂酸诱导RASMC细胞骨桥蛋白基因的上调及SMA-α基因的下调,TLR4-siRNA转染细胞后可显著抑制溶血磷脂酸诱导的RASMC细胞骨桥蛋白基因上调及SMA-α基因下调,但对于RASMC细胞形态没有影响,部分抑制溶血磷脂酸诱导的RASMC细胞表型转化。结论溶血磷脂酸可能部分通过TLR4信号途径,促进细胞表型的转化,阻断TLR4受体,抑制信号通路后的炎症反应及免疫反应,有可能成为干预动脉粥样硬化潜在途径。
Toll样受体、RNA干扰、溶血磷脂酸、血管平滑肌细胞、表型转化
R34(人体生物化学、分子生物学)
湖北省教育厅科学技术研究计划优秀中青年人才基金资助项目Q20121117
2015-07-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1150-1153,1161