TAp63对MPP+处理的SH-SY5Y细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9和酪氨酸羟化酶表达的影响
目的 探讨TAp63基因表达水平对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞模型细胞活性、酪氨酸羟化酶(TH)和凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的影响.方法 将小鼠神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞系)依据不同处理方法分为6组:①对照组,无任何干预措施;②MPP+处理组,MPP+10μmol·L-1处理24 h;③TAp63-NC组,用携带无义序列的慢病毒颗粒转染48 h;④TAp63-NC+MPP+组,用携带无义序列的慢病毒颗粒转染48 h后,加MPP+10μmol·L-1处理24 h;⑤TAp63过表达组,用携带过表达TAp63基因的慢病毒颗粒转染48 h;⑥TAp63过表达+MPP+组,用携带过表达TAp63基因的慢病毒颗粒转染48 h,换液后予以MPP+10μmol·L-1处理24 h.采用CCK-8法检测6组细胞的存活率;Western blot法检测TAp63、TH、caspase-9表达水平.结果 CCK-8检测显示,与对照组比较,MPP+组细胞活性显著下降(P<0.01).与TAp63-NC+MPP+组比较,TAp63过表达+MPP+组细胞存活率升高,差异有显著统计学意义(P<0.001).Western blot检测显示:与对照组比较,MPP+组的TAp63蛋白和TH蛋白表达量降低,而caspase-9表达量升高(均P<0.05);与TAp63-NC+MPP+组比较,TAp63过表达+MPP+组TAp63蛋白和TH蛋白表达量升高,而caspase-9蛋白表达水平降低(均P<0.05).结论 TAp63基因过表达可提升MPP+诱导的PD细胞的存活率,提高TH表达量,降低caspase-9表达水平,进一步发挥其潜在的神经保护作用.
帕金森病、TAp63基因、酪氨酸羟化酶、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9、SH-SY5Y细胞系、1-甲基-4-苯基吡啶离子
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R742.5;Q189(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金81971192
2023-05-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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