利用CRISPR/Cas9技术将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因

摘要：

目的 将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因,拟通过Cre/LoxP系统条件性敲除Alk1基因建立脑动静脉畸形小鼠模型.方法 利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠Alk1基因:①设计和选择两个单导向RNA(sgRNA)分别识别外显子3～4和8～9的非编码区位点;②设计带有2个LoxP序列且与靶基因同源的供体载体;③将体外合成的sgRNA,Cas9 mRNA和供体载体注射到小鼠受精卵;④受精卵经假孕小鼠代孕出生后,经PCR和测序筛选目标小鼠.结果 小鼠Alk1等位基因的特定位点插入了LoxP序列.结论 CRISPR/Cas9技术能成功将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因,为建立脑动静脉畸形小鼠模型创造条件.

关键词：CRISPR/Cas9、Alk1基因、小鼠、动静脉畸形

所属期刊栏目：23

分类号：Q189;R743.4(寄生生物学)

资助基金：上海市科学技术委员会实验动物研究领域项目13140903300;国家自然科学基金81000489

在线出版日期：2015-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：615-623