血清反应因子参与皮质神经元缺糖缺氧诱导坏死样凋亡的实验研究

摘要：

目的 探讨血清反应因子(SRF)在皮质神经元中的定位及缺糖缺氧(OGD)再灌注损伤后神经元坏死样凋亡中的作用.方法 皮质神经元:①培养第6天,免疫荧光观察4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)核染及β3-tubulin神经元特异性标志物表达,验证培养神经元的纯度；②培养第14天,二氨基联苯胺(DAB)显色法观察SRF定位；③培养第6天,给予慢病毒(HIV病毒载体)干扰SRF表达；④培养第14天,制作OGD模型(OGD 2 h,复灌8 h),预给予广谱抗凋亡抑制剂(zVAD-fmk)20 μmol·L-1 30 min.将细胞分为:正常对照组(对照组)；OGD/zVAD-fmk/SRF慢病毒阴性对照组(OZ组)；ODG/zVAD-fmk/SRF慢病毒阳性组(OZ+组).经比色法、Western blot等方法观察SRF蛋白和乳酸脱氢酶(LDH)水平的变化.结果 SRF在神经元中定位于细胞核；经SRF干扰后OZ+组SRF蛋白水平下调(P＜0.05)；不同处理组神经元分泌LDH水平与SRF蛋白水平变化一致(P＜0.05).结论 SRF参与皮质神经元缺血/再灌注损伤后神经元坏死样凋亡,定位于胞核.

关键词：血清反应因子、坏死样凋亡、缺糖缺氧、原代皮质神经元

所属期刊栏目：21

分类号：R743;Q189(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金资助课题30700245;江苏省自然科学基金资助课题16621218

在线出版日期：2013-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：271-276