人肌肉生长抑素蛋白原核表达及纯化

摘要：

目的:克隆人肌肉生长抑素(myostatin)基因并在大肠埃希菌中表达,纯化目的蛋白后制成冻干粉剂.方法:通过RT-PCR方法得到人myostatin基因的cDNA序列,构建重组克隆质粒pGEM5zf(+)myostatin-s及表达质粒pET32a (+)-myostatin-s,在合适条件下通过大肠埃希菌表达系统诱导表达并纯化该蛋白(myostatin-s),最终制成冻干粉剂.结果:成功构建重组质粒,并经测序与GeneBank资料Myostatin (GI:2623581)序列完全一致.经异丙基-b-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导及纯化获得相对分子质量为33 000融合蛋白,并经Western blot证实后制成冻干粉剂.结论:通过重组基因片段可以获得纯化myostatin的成熟肽片段-融合蛋白myostatin-s,制成的冻干粉剂将为进一步人肌肉生长抑素免疫学研究奠定基础.

关键词：人肌肉生长抑素、质粒、基因重组、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：19

分类号：R746.4(神经病学与精神病学)

资助基金：宁波市科技局社会发展项目2007008

在线出版日期：2011-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：402-407