QDs-SA和Cy3荧光标记阿尔茨海默病细胞模型β淀粉样蛋白的比较研究

摘要：

目的:观察利用量子点(QDs )标记的链霉亲和素复合物(QDs-SA)和传统荧光染料Cy3分别标记的阿尔茨海默病 (AD)转基因细胞模型β淀粉样蛋白(Aβ)在荧光强度和抗光漂白性能的差异.方法:将pcDNA3.1/APP质粒转染至HEK293细胞建立稳定表达株,Western blot法检测转染细胞APP蛋白的表达,细胞免疫荧光检测Aβ 蛋白生成.建立AD转基因细胞模型,分别应用QDs-SA和Cy3细胞免疫荧光染色技术靶向标记转基因细胞模型的A b蛋白,激光共聚焦显微镜下对荧光强度和抗光漂白特性进行检测.结果:Western blot法在稳定转染pcDNA3.1/APP质粒的细胞中检测到APP目的蛋白谱带,而未转染的空载体转染组细胞未见APP蛋白表达.共聚焦荧光显微镜下观察到: ①APP基因转染后能够生成大量Aβ蛋白;②QDs-SA特异标记的A b蛋白主要分布在细胞膜和胞质,显现出均匀分布的高密度橙红色强荧光;③Cy3特异标记Aβ蛋白荧光强度较QDs-SA标记弱,且细胞膜染色不均匀,部分细胞膜区域有染料少量团聚;④QDs-SA相较于传统Cy3荧光染料的平均荧光强度值更大( P<0.05),488 nm激发光连续激发12 min,QDs-SA荧光标记的Aβ蛋白仍发射较强的橙红色荧光,荧光强度下降了29.25%,而传统荧光染料Cy3荧光强度下降幅度达 76.82%.结论:QDs-SA能有效识别AD转基因细胞模型中Aβ蛋白,且在光稳定性和荧光强度等方面均优于传统的 Cy3荧光染料标记的免疫荧光成像.

关键词：阿尔茨海默病、量子点、β淀粉样蛋白、分子成像、激光共聚焦显微镜

所属期刊栏目：18

分类号：R741(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30770736

在线出版日期：2010-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：225-230