兔抗人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的:表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白,制备高质量的兔抗人IRGM多克隆抗体.方法:将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-2和真核表达载体pCMV-myc,测序验证序列正确.在大肠埃希菌E.coli BL21中表达IRGMa/GST融合蛋白,用纯化的可溶性IRGMa/GST融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗人IRGM抗体,采用ELISA、免疫印迹和竞争抑制等多种方法验证其敏感度和特异度.结果:自制的兔抗人IRGM多克隆抗体的特异度和敏感度均较高,效价更高于市售抗体.结论:成功制备了兔抗人IRGM多克隆抗体,为进一步的功能研究打下基础.

关键词：免疫相关鸟苷三磷酸酶基因、融合蛋白、多克隆抗体

所属期刊栏目：17

分类号：Q189(寄生生物学)

资助基金：福建省自然科学基金重点项目C0520002;福建省卫生厅青年科研基金2006-1-3

在线出版日期：2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：601-605