利用人源化酵母系统模拟tomosyn在囊泡运输过程中的功能

摘要：

突触囊泡融合是由syntaxin-1A,synaptobrevin-2和突触小体相关蛋白25(SNAP-25)三个突触N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(SNARE)蛋白共同介导完成的.这些突触SNARE蛋白之间的相互作用受到包括tomosyn在内的多种辅助蛋白的调控.tomosyn是一个syntaxin结合蛋白,并且它是一个突触囊泡融合的负调控因子.然而,tomosyn的具体作用方式并不完全清楚.本研究在酵母细胞中重构了tomosyn的抑制作用模型.SNARE蛋白是一种保守的蛋白,在酵母中,突触SNARE蛋白的同源蛋白参与了分泌囊泡和细胞膜的融合.Sso1是酵母中syntaxin-1A的同源蛋白.在之前的实验中,我们构建了一个SNARE嵌合体,命名为Sso1/187k-STX1AD133V,其中将Sso1的一部分替换为syntaxin-1A的相应部分.这个SNARE嵌合体可以取代Sso1在酵母细胞中的功能.过表达tomosyn对野生型酵母细胞的生长没有影响.然而,tomosyn的过表达干扰了含有Sso1/187K-STX1AD133v的细胞的生长.酵母双杂交试验结果表明,在酵母细胞中,tomosyn与syntaxin相互作用,而不是与Sso1相互作用.因此,我们可以使用含有Sso1/187K-STX 1AD133V的酵母细胞作为分析tomosyn功能的工具.

关键词：酿酒酵母、tomosyn、syntaxin-1A、Sso1、SNARE

所属期刊栏目：49

在线出版日期：2019-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：659-670