水稻靶标基因单碱基定向替换技术的建立

摘要：

目前CRISPR/Cas9技术作为一种基因组定点编辑技术已经被广泛应用于不同植物中,但是对于实现特定碱基替换仍具有很大难度.本研究将APOBEC1和UGI与Cas9n融合,开发了一种包含rBE3和rBE4的高效技术,并通过该技术对OsSERK1,OsSERK2,ipa1,pi-ta和OsBRI1等基因的靶位点碱基进行编辑.在To代转基因植物中rBE3/sgRNA将胞嘧啶碱基转换为所有其他核苷酸碱基中效率高达38.9％;利用rBE4还获得了抗稻瘟基因pi-ta的隐性等位基因靶位点胞嘧啶碱基替换为胸腺嘧啶碱基,编辑效率达18.2％.此外,在所检测的材料中,并未检测到由Cas9n切口酶引起的InDel事件.这些结果表明,rBE3和rBE4技术的开发,在未来植物基础研究和农业应用中具有广阔的前景.

关键词：碱基编辑器、大鼠胞苷脱氨酶、CRISPR/Cas9、功能获得性突变体

所属期刊栏目：47

分类号：R73;R44

资助基金：中国农业科学院科技创新工程和植物病虫害国家重点实验室开放基金

在线出版日期：2018-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1177-1185