基于环氧功能基团的杂化硅胶固定化酶反应器

摘要：

在蛋白质组学研究中,为解决自由溶液酶解时间长、蛋白酶自降解等问题,各种类型的固定化酶反应器引起了人们的关注.采用溶胶凝胶法,在100μm内径毛细管内,以3-(甲基丙烯酞氧)丙基三甲氧基硅烷为功能单体,以四乙氧基硅烷为交联剂,制备了一种新型的杂化硅胶整体材料.并通过在整体柱表面由环氧功能团水解得到的二醇与胰蛋白酶(trypsin)的氨基进行一步反应,实现了胰蛋白酶固定化.利用该IMER,在47s内实现了牛血清白蛋白的酶解;经反相色谱分离和质谱鉴定,序列覆盖率在35%以上,与自由溶液酶解12 h的效果相当.结果表明,基于亲水性杂化硅胶整体材料的IMER有望在蛋白质组学研究中发挥重要作用.

关键词：固定化酶反应器、有机无机杂化整体柱、蛋白质、高效液相色谱-质谱

所属期刊栏目：40

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：国家重大科学研究计划2007CB914100;国家自然科学基金20935004

在线出版日期：2011-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：874-879