10.3321/j.issn:1006-9259.2008.08.010
马立克氏病病毒pp38/pp24聚合体结构及其对pp38基因上游双向启动子活性的影响
前期以氯霉素乙酰转移酶(CAT)活性为指标的研究证明了,马立克氏病病毒(Marek's disease vires,MDV)的pp38和pp24的同时表达可显著增强基因组中pp38基因与1.8kbmRNA转录子之间双向启动子的转录活性.本研究又以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达水平作为pp38基因上游双向启动转录活性的标志,更直观地证明了只有当同一细胞内同时表达pp38和pp24时,该启动子活性才有完整的启动活性.为了证明这两个蛋白能否相结合,分别以单独表达pp38或pp24的重组质粒pcDNA-pp38或pcDNA-pp24及能同时表达这两个基因的重组质粒pBud-pp38-pp24质粒转染鸡胚成纤维细胞(CEF),用pp38特异的单克隆抗体H19对转染细胞的裂解标记物进行免疫沉淀实验.结果表明,H19可沉淀pp38,但pp24只是在pp38同时存在时才被H19沉淀,而在pcDNA-pp24单独转染的处理样品中不能显示pp24的条带.这证明了,pp24是通过与pp38的结合而被共沉淀下来的,显示pp24和pp38在天然状态下可以形成异二聚体或多聚体.上述两个独立的实验结果表明,pp38和pp24是以聚合体的形式结合于该双向启动子发挥作用的.
马立克氏病病毒、(Marek’s disease vires、MDV)、pp38/pp24聚合体、双向启动子
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R3(基础医学)
国家自然科学基金青年基金30700596;国家自然科学基金30070544
2009-04-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
760-765