大鼠骨髓间充质干细胞在正常及激光损伤视网膜下移植分化的差异

摘要：

观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外不诱导的条件下视网膜移植于正常或大鼠Nd:YAG激光损伤视网膜后的定位以及蛋白表达情况.体外培养大鼠MSCs,用荧光染料DAPI标记MSCs,视网膜下移植后分别于10,20,35和50天处死动物,做DAPI荧光观察,并在阳性的连续切片上做神经元核(neuronal nuclei,NeuN)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和角蛋白(pancy- tokeratin,CK)免疫组化染色及HE染色.对损伤大鼠分别于损伤前及损伤后即刻、1～7周检测损伤移植组、损伤组和损伤注射生理盐水组的视网膜电流图(ERG)b波分析.培养的MSCs集落生长迅速,均一性好,DAPI染色观察表明,10天时移植细胞多集中于移植部位周围,正常移植组可见分层,而损伤移植组分布散乱; 20天时两组均可见阳性细胞分布范围扩大,分布于视网膜各层; 35天正常移植组阳性细胞范围与20天基本相同,而损伤组则进一步扩大,且细胞开始向损伤部位迁移; 50天正常移植组荧光范围比35天小,未发现细胞增生,损伤组损伤范围与35天相比扩大不明显,但许多部位有增生.免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞在NeuN,NSE,GFAP和CK 的表达有不均一性.HE染色表明移植组损伤的恢复好于损伤对照组,ERG b波检测表明5周后损伤移植组的b波水平高于对照组.MSCs可在正常及激光损伤的大鼠视网膜下与原视网膜结构相融合,检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层,正常移植组随时间延长荧光范围缩小,损伤移植组荧光分布范围随时间延长分布较广,但细胞的排列和蛋白表达有紊乱.MSCs的移植对激光损伤斑及ERG b波的恢复有促进作用.

关键词：骨髓间充质干细胞、视网膜、激光、绿色荧光蛋白、细胞移植

所属期刊栏目：34

分类号：R77(眼科学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB509906,G1999053903;国家高技术研究发展计划863计划2001AA216151,2002AA205051;北京市科技新星计划项目H020220010190;军队指令性项目01L020

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：41-48