10.3969/j.issn.2095-2783.2017.18.009
水牛bFGF基因的克隆、逆转录病毒载体的构建和鉴定
对水牛碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因进行克隆、序列分析,构建bFGF表达载体,为其在水牛干细胞中的功能研究奠定基础.以水牛胎儿组织为材料提取总RNA,利用逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)克隆得到的bFGF基因编码区序列,进行生物信息学分析,构建表达bFGF的逆转录病毒载体(pMXs-bFGF-IRES-GFP),并在293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞(buffalo fetal fibroblast,BFF)上进行重组载体表达鉴定.结果表明,水牛bFGF基因编码区全长468 bp,编码155个氨基酸,含有纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)家族特有的蛋白结构;逆转录病毒载体介导的bFGF基因能在293T细胞和BFF中表达.本研究克隆出水牛bFGF编码序列,构建的逆转录病毒载体能在不同真核细胞中表达bFGF.
生物化学及分子生物学、水牛、碱性成纤维细胞生长因子、克隆、真核表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20134501120003;国家自然科学基金资助项目31360287;广西省自然科学基金资助项目2014GXNSFBA118074,2015GXNSFAA139080
2018-01-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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2086-2091