10.3969/j.issn.2095-2783.2015.12.019
酿酒酵母菌中过量表达 BAT2和缺失 PDC6提高异丁醇产率
利用酿酒酵母发酵生产生物质能源异丁醇越来越受到学术界和工业界的重视。本研究通过 DNA 重组技术,提出一种提高酿酒酵母合成异丁醇的产率的方法。通过对酿酒酵母异丁醇合成代谢途径分析,过量表达了编码分支氨基酸转氨酶的BAT2基因和缺失编码内源性丙酮酸脱羧酶的PDC6基因,同时构建过量表达编码乙酰乳酸合酶 ILV2基因和编码二羟基戊酸脱水酶的ILV3基因的表达质粒。将所构建突变株 HAZL-7 pILV2 pILV3(W303-1A PGK1p-BAT2 pdc6:R YEplac195-ILV3p-PGK1p-ILV3 YEplac181-PGK1p-ILV2)进行厌氧发酵。厌氧发酵60 h,发酵液中异丁醇的产率从0.035 g/L 到0.4 g/L,提高了11.4倍,乙醇的产率减少,乙酸的产率升高,甘油的产率基本稳定。酿酒酵母菌中过表达 BAT2基因和缺失PDC6基因,同时过量表达 ILV2和ILV3的表达质粒载体的基因修饰,对异丁醇的代谢流有明显的影响,异丁醇的产率提高11.4倍。这些研究为异丁醇产量的进一步提高奠定了理论基础。
酿酒酵母、异丁醇、BAT2、PDC6、ILV2、ILV3
Q789(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助项目21206028;高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20121317120014;河北省自然科学基金资助项目B2013202288
2015-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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