碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌染色体介导黏菌素耐药机制研究

摘要：

目的 探究碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)药物暴露后染色体序列突变,以及突变与黏菌素耐药之间的关系,为临床合理用药、减少耐药发生提供依据.方法 黏菌素对临床分离株CRKP 12-130最低抑菌浓度(MIC)为0.25 mg/L,将100μL该菌过夜培养菌液分别涂布于含2倍～32倍MIC黏菌素的MH琼脂平板上,获取耐药突变株;采用细菌基因组提取试剂盒提取基因组DNA并进行二代测序;通过PCR法检测黏菌素耐药相关基因.结果 从不同浓度梯度黏菌素的MH琼脂平板中各取50个菌落传代10次后作为受试菌株测其MIC,在2倍MIC和4倍MIC黏菌素的MH琼脂平板上选择出的突变株分别有33株和47株对黏菌素耐药(MIC≥4 mg/L).8倍MIC、16倍MIC和32倍MIC黏菌素的MH琼脂平板上选择出的突变株均对黏菌素耐药.从中挑选40株MIC值不同的菌株进行二代测序,结果显示有15株菌株mgrB基因完全缺失,2株菌株mgrB基因发生部分缺失,2株菌株的mgrB基因中出现替换(G82T),并导致氨基酸序列改变(G28C).利用mgrB基因两翼序列进行PCR引物设计,将PCR产物进行电泳后发现,230株耐药突变株中有103株存在mgrB基因的改变.结论 CRKP在不同浓度的黏菌素选择压力下,均会选择出自发耐药突变株.mgrB基因的完全缺失是造成该类自发突变株对黏菌素耐药的最主要机制.

关键词：碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌、黏菌素、突变、染色体、mgrB基因

所属期刊栏目：22

分类号：R378.996(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;上海市青年科技英才扬帆计划

在线出版日期：2022-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：322-326