应用PCR-RFLP技术检测阿德福韦耐药相关性HBV变异

摘要：

目的 建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦(ADV)耐药相关性HBV变异(rtA181V/T/S和rtN236T变异)的方法.方法 根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物,使野毒株的PCR产物上游末端引入BglI 的酶切位点,使rt236变异株的PCR产物下游末端引入BseDI(SecI)的酶切位点,建立PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法.用此方法分别检测含rt181变异株、rt236变异株及野毒株质粒和3例ADV耐药慢性乙型肝炎患者血清标本.将变异株和野毒株配成不同比例,再用此方法检测,以了解该方法的敏感性.结果 本研究建立的PCR-RFLP方法可同时检测rt181变异和rt236变异;用此方法检测血清标本,结果与测序及克隆分析一致;此方法可检测出标本中10%的变异株.结论 应用PCR-RFLP方法可同时检测rtA181V/T/S和rtN236T变异,具有较高的敏感性,可用于ADV耐药变异的早期诊断.

关键词：乙型肝炎病毒、阿德福韦耐药、聚合酶链反应、限制性片段长度多态性

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分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：上海市科委临床医学重点项目054119529

在线出版日期：2007-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：362-367