10.3321/j.issn:1009-7708.2006.06.005
运用变性高效液相色谱快速检测CTX-M超广谱β内酰胺酶基因型
目的 应用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对确认产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株CTX-M型质粒酶进行基因分型,探讨其灵敏度和特异度,以建立快速检测CTX-M型ESBLs的新方法.方法 采用PCR技术从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出CTX-M型质粒的编码序列,用DHPLC技术对扩增产物进行分析和DNA测序,确定其基因突变的类型,通过比对两者结果后确定其基因型.结果 从34株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出35份CTX-M型ESBLs编码序列(其中1株同时扩增到2份CTX-M型编码序列).11份与标准菌株CTX-M-3一致;4份与标准菌株CTX-M-9一致;测序确定分别为CTX-M-3型和CTX-M-9型;20份表现为3种形态各异的异常洗脱峰,测序结果表明20份样本与其标准株对比均存在着基因突变,DHPLC中异常峰一致的样本均为同一基因亚型.结论 DHPLC可用于ESBLs基因分型的检测,能快速检测CTX-M的基因型,具有准确性高、简便快捷、经济等特点,有很大的临床应用价值.
变性高效液相色谱、超广谱β内酰胺酶、CTX-M型、基因型
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R3(基础医学)
广东省科技厅科技计划2002C30404
2007-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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