10.3321/j.issn:1009-7708.2004.06.002
4株产TEM型超广谱β内酰胺酶肠杆菌科细菌的研究
目的:鉴定临床分离的3株大肠埃希菌和1株肺炎克雷伯菌所产的TEM型β内酰胺酶编码基因的序列,并进行原核表达,了解其相关特性.方法:聚合酶链反应(PCR)扩增TEM型β内酰胺酶编码基因片段,克隆人pGEM-T easy载体,表达于感受态细胞大肠埃希菌DH5α中,双脱氧链终止法测定核苷酸序列,确定基因型;其基因与原核表达载体(pET-28c)连接,并在感受态细胞大肠埃希菌DH5α中进行原核表达,提取质粒,用PCR进行表达鉴定,用超广谱β内酰胺酶(ESBLs)表型确认试验鉴定表达菌株的表型,另外对这些临床菌株进行接合试验.结果:PCR扩增结果显示这4株细菌产生的TEM型β内酰胺酶编码基因片段含981个核苷酸,其表达酶的性质均为ESBLs,临床菌株的质粒接合试验均为阳性.这4株临床菌株所产生的TEM型β内酰胺酶的编码基因已被GenBank命名为TEM-10(GenBank注册号:U95363).结论:安徽地区这4株细菌所产TEM型β内酰胺酶均为TEM-10,在国内我们首次从临床分离株中发现TEM-10.
超广谱β内酰胺酶、序列分析、接合试验、原核表达
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R378.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
安徽省教育厅自然科学基金2003kj201
2005-01-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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