10.3969/j.issn.1004-406X.2018.03.11
二甲基乙二酰基甘氨酸对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞增殖和分化的影响
目的:探讨低氧模拟剂二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的增殖、成骨分化及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:将MC3T3-E1细胞接种到培养板24h后,实验组培养基中分别加入50μM (50μM组)和200μM(200μM组)的DMOG,对照组加入完全培养液.分别于培养1、3、5d时采用MTT法检测MC3T3-E1细胞增殖情况,5、10d行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及ALP活性检测成骨细胞分化,21d用茜素红染色检测MC3T3-E1细胞钙结节的形成并进行定量分析,采用ELISA法检测MC3T3-E1培养3d情况时上清液中的VEGF蛋白含量,并用实时荧光定量PCR法检测MC3T3-E1细胞VEGF mRNA的相对表达量.结果:培养ld时对照组、50μM组和200μM组的MC3T3-E1的光密度(optical density,OD)值分别为0.041 ±0.009、0.074±0.019、0.086±0.044,3d时分别为0.123 ±0.027、0.148 ±).020、0.224±0.061,5d时分别为0.297±0.044、0.325±0.084、0.354±0.038,1d、3d时50μM组和200μM组与同时间点对照组比较均有显著性差异(P＜0.05),3d时50μM组与200μM组有显著性差异(P＜0.05).培养5d和10d时对照组ALP染色颜色较深,50μM组颜色中等,200μM组颜色较浅;5d时对照组ALP活性为1.943±0.072,50μM组为1.632±0.051,200μM组为1.319±0.065;10d时对照组ALP活性为3.734±0.067,50μM组为3.381±0.070,200μM组为2.831±0.086.三组间同时间点比较均有统计学差异(P＜0.05),同组10d时与5d时比较均有统计学差异(P＜0.05).茜素红染色200μM组可见少量红色结节,50μM组可见中等量红色结节,对照组可见大量红色结节;对照组茜素红含量(μg/ml)为56.178±7.940,50μM组为41.922±2.438,200μM组为31.929± 1.922,三组间比较均有统计学差异(P＜0.05).培养3d时对照组细胞培养上清液中VEGF蛋白含量(ng/孔)为9.063±0.603,50μM组为12.123±0.870,200μM组为15.540±0.581,三组间比较均有统计学差异(P＜0.05);50μM组VEGF mRNA表达量为对照组的1.792±0.067,200μM组为对照组的3.963±0.092,三组间比较均有统计学差异(P＜0.05).结论:低氧模拟剂DMOG可促进MC3T3-E1细胞增殖和VEGF表达,抑制其成骨分化.
二甲基乙二酰基甘氨酸、小鼠胚胎成骨细胞前体细胞、碱性磷酸酶、血管内皮生长因子、成骨分化
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Q813(生物工程学(生物技术))
2018-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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