神经调节素对缺血再灌注损伤大鼠脊髓MMP-9和TIMP-1表达的影响

摘要：

目的:观察神经调节素-1β(neuregulin-1β,NRG-1β)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脊髓组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,并初步探讨其作用与机制.方法:48只SD大鼠随机分为对照组(n=16)、缺血再灌注组(模型组,n=16)、NRG-1β治疗组(n=16),对照组仅分离暴露腹主动脉,其余两组采用腹主动脉阻断法制备动物模型.治疗组在打开动脉夹后立即经尾静脉注射NRG-1β(10μg/kg),缺血再灌注模型组在打开动脉夹后立即经尾静脉注射等量的0.1 mol/L的PBS缓冲液.于取材前3min根据改良Tadov评分标准进行神经功能评分.分别于术后3h、6h、12h、24h取材(每个时间点4只),HE染色观察脊髓病理变化,免疫组化和Real-time PCR分别检测MMP-9、TIMP-1蛋白和mRNA水平的表达.结果:模型组在术后各时间点的Tarlov评分较对照组显著下降(P＜0.05),治疗组在术后6h、12h、24h的Tarlov评分较模型组显著增高(P＜0.05).HE染色显示模型组和治疗组均存在脊髓组织损伤,但治疗组较模型组减轻.免疫组化结果显示,对照组未见MMP-9、TIMP-1阳性表达细胞;模型组MMP-9免疫阳性细胞数(个/高倍视野)在术后3h、6h、12h、24h分别为9.00±1.63、23.80±1.71、28.30±1.50、34.80±2.63,治疗组分别为8.50±0.58、17.80±0.96、20.80±3.50、30.00±2.16,其中6h、12h、24h治疗组与模型组相比阳性细胞数明显减少(P＜0.05).模型组TIMP-1免疫阳性细胞数(个/高倍视野)在术后3h、6h、12h、24h分别为11.80±0.96、12.30±1.50、7.80±0.96、7.80±1.50,治疗组分别为12.30±0.96、13.80±0.96、10.50±1.73、10.30±0.96,其中12h、24h治疗组与模型组相比阳性细胞数明显增多(P＜0.05).对照组MMP-9在术后3h、6h、12h、24h的mRNA表达量分别为4.93±0.21、4.95±0.24、4.96±0.25、4.98±0.23,模型组分别为5.38±0.25、6.53±0.31、6.87±0.29、7.53±0.33,治疗组分别为5.35±0.26、5.56±0.22、5.74±0.27、5.90±0.31,其中6h、12h、24h模型组与对照组比较MMP-9的mRNA表达量明显增加(P＜0.05),6h、12h、24h治疗组MMP-9的mRNA表达量较模型组明显减少(P＜0.05).对照组TIMP-1在术后3h、6h、12h、24h的mRNA表达量分别为4.74±0.23、4.76±0.21、4.73±0.25、4.76±0.24,模型组分别为4.53±0.32、4.62±0.21、3.83±0.20、3.65±0.32,治疗组分别为4.55±0.26、4.65±0.27、4.28±0.22、4.25±0.24,其中12h、24h模型组与对照组比较TIMP-1的mRNA表达量明显减少(P＜0.05),12h、24h治疗组TIMP-1的mRNA表达量较模型组明显增加(P＜0.05).结论:神经调节素可在大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中发挥神经保护作用,该作用的实现可能与MMP-9的表达下调和TIMP-1的表达上调有关.

关键词：脊髓损伤、神经调节素、缺血再灌注、基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶组织抑制剂-1、大鼠

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分类号：R683.2;Q593+.2(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2016-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：642-649