成人黄韧带细胞的体外培养

摘要：

目的:探讨成人黄韧带细胞的体外培养方法,为研究黄韧带退变的发病机制奠定基础.方法:采集成年胸腰椎骨折患者后路减压术中的黄韧带,应用胶原酶颅消化组织块培养法分离黄韧带细胞,并传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;传1、3、5代细胞培养1～8d,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸光度(OD)值,评价细胞增殖状况,并绘制细胞生长曲线;用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原的表达.结果:在原代培养第10～14天,黄韧带细胞开始从组织块迁出,细胞呈多种形态,主要为梭形和多角形,细胞接近融合时呈涡流状生长.传1、3、5代细胞生长曲线呈S形,同一代细胞在不同时间点的OD值差异有统计学意义(P<0.001),同一时间点不同代次细胞的OD值无统计学差异(P>0.05),细胞代次与时间点间无交互效应,各代细胞增殖状况无统计学差异(F=0.283,P=0.957).传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原免疫荧光染色呈阳性.结论:胶原酶预消化组织块培养法能有效分离成人黄韧带细胞:体外培养的黄韧带细胞呈成纤维细胞样表型.细胞在传5代以内生物学特性稳定.

关键词：黄韧带、细胞培养、退行性变

所属期刊栏目：20

分类号：R686.5;Q813.1(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2010-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：62-65