低浓度TNF-α对大鼠髓核间充质干细胞增殖及迁移的影响

摘要：

[目的]探讨低浓度TNF-α对大鼠髓核间充质干细胞(nucleus pulposus derivedstem cells,NPSCs)增殖及迁移特性的影响.[方法]差速贴壁法从SD大鼠尾椎髓核组织中分离NPSCs,体外培养,镜下观察细胞形态和生长状况;取P3代细胞利用流式细胞仪鉴定干细胞表面抗原;使用诱导培养基进行三系诱导分化,3周后分别用茜素红、油红O、阿利辛蓝染色观察成脂、成骨、成软骨能力.用含不同浓度(0、0.1、1、10 ng/ml) TNF-α的血清培养液培养P3代细胞,0、1、3、5、7d后CCK-8法检测细胞增殖活力(OD值),划痕实验及Transwell迁移实验比较各组细胞迁移能力.[结果]P0代细胞呈集落样生长,细胞形态呈纺锤状.P3代细胞免疫表型鉴定MSCs表面分子标记CD90、CD29、CD44表达比例分别高达96％、99％、97％以上,低表达CD45、CD34(低于5％和4％).茜素红、油红O及阿利新蓝染色证实分离的细胞可向骨、脂肪及软骨分化.按照ISCT有关MSCs的判定标准,分离的细胞即NPSCs.用含TNF-α培养液培养髓核间充质干细胞1、3、5、7d后,与对照组相比,低浓度的TNF-α均促进了NPSCs的增殖.Transwell及划痕实验表明随着TNF-α浓度的增加,NPSCs的迁移能力上升.[结论]低浓度的TNF-α(0.1～10 ng/ml)能促进NPSCs增殖及迁移能力.

关键词：椎间盘退变、TNF-α、髓核间充质干细胞、增殖、迁移

所属期刊栏目：26

分类号：R687(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81470102,81171740

在线出版日期：2018-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：242-247