10.3977/j.issn.1005-8478.2012.17.20
生长分化因子5促进软骨细胞肥大成熟的实验研究
[目的]探讨生长分化因子5(GDF-5)在诱导成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成软骨分化的同时,促进其肥大成熟的作用.[方法]体外分离培养hBMSCs,取第四代细胞实验.将细胞消化、悬浮,以5×106/ml的细胞密度进行高密度培养,分别用含0.500ng/ml GDF-5的软骨诱导液(CM)诱导培养3、4周.免疫组化、甲苯胺蓝染色检测Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原和蛋白多糖的表达情况.荧光实时定量RT-PCR检测两组微团Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原和蛋白多糖mRNA的表达情况.[结果]实验组微团中的细胞体积较对照组稍大,细胞密度稍低.甲苯胺蓝和免疫组化染色结果显示各组微团均有Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原和蛋白多糖的表达和分泌,且4周实验组的表达最为强烈.荧光实时定量RT-PCR检测示,干预后3周实验组Ⅱ型胶原、蛋白多糖基因表达量明显高于3周对照组(P<0.05),但Ⅹ型胶原基因表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05);干预后4周实验组Ⅹ型胶原基因表达高于其余各组(P<0.05),Ⅱ型胶原、蛋白多糖基因表达明显高于两对照组(P<0.05),但与3周实验组相比较,差异无统计学意义(P>0.05).[结论]GDF-5在诱导细胞成软骨分化的同时,还可促进其成熟肥大.
成人骨髓间充质干细胞、生长分化因子5、软骨分化、成熟肥大
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R687(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
2012-12-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1611-1614