两法提取皮质骨Ⅰ型胶原的比较研究

摘要：

[目的]通过对两种方法提取的骨胶原产量及特性的比较,推荐-种较为理想的提取皮质骨Ⅰ型胶原的方法.[方法]以猪皮质骨为原料,去除软组织后劈成小骨块,经酒精梯度脱水、无水乙醚脱脂、盐酸脱钙、甲醇:氯仿(1:1,v/v)再脱脂处理后,骨块软化.然后将软化的骨块在高速粉碎机上粉碎成脱钙骨基质粉.分别采用传统的碱溶法和自建的增强酶解法对脱钙骨基质粉处理,经溶解、离心、透析、冻干等操作提取皮质骨胶原.最后对增强酶解法所得产物进行鉴定,并对两种提取方法的效率及得到的产物的外观、黏度、凝胶固化性进行比较.[结果]增强酶解法所得胶原的氨基酸组成、蛋白电泳、相对分子量大小、最大光吸收波长均符合Ⅰ型胶原特征;和碱溶法比较,提取率由(57.8±4.96)%提高到(94.04±0.55)%;其相同浓度(0.03%,w/v)醋酸溶液黏度测定,增强酶解法为3.71,碱提法为2.81;在37.0℃,pH值7.35～7.45条件下行凝胶固化性检测,增强酶解法所提胶原凝胶液约10 min可固化形成凝胶块,而碱提法所提胶原的溶液仍为黏性液体.[结论]增强酶解法提取的骨胶原是Ⅰ型胶原;相对于碱提法,该法提取效率高,所得胶原纯度高、黏性好、固化性好,是一种较好的从猪皮质骨中制备Ⅰ型胶原的方法.

关键词：皮质骨Ⅰ型胶原、增强酶解法、碱溶法

所属期刊栏目：15

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家高技术研究计划发展专项经费2003AA205020

在线出版日期：2007-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：463-466