猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx对仔猪树突状细胞活化的影响

摘要：

目的 探讨猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ESA)硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)对仔猪树突状细胞(DC)活化的影响.方法 体外诱导培养健康仔猪髓源DC,培养7 d后,加入终浓度为100 ng/ml的脂多糖(LPS)刺激,继续孵育2d,分别收集培养未成熟DC(imDC)和成熟DC(mDC),光学显微镜和扫描电镜下观察其培养1～9 d的形态学变化,流式细胞术检测其表面标志物CD1和主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表达情况.另收集培养后7 d的imDC,设阴性对照组、TPx组、排泄分泌抗原(ESA)组、LPS阳性对照组,分别加入 RPMI 1640 培养基、TPx(50μg/ml)、ESA(50μg/ml)、LPS(100 ng/ml)刺激 48 h后,流式细胞术检测DC表面标志物MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达情况;ELISA检测DC细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、1L-10、IL-12的分泌水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 光学显微镜下可见,培养第1天,imDC呈卵圆形,形态单一;随着培养时间延长,DC体积逐渐增大,出现伪足和刺突等,并从卵圆形变为不规则状.扫描电镜下可见,与imDC相比,mDC形态不规则,大致呈长梭形,从胞体辐射出众多长短不一的突起,呈树枝状分布,为典型的树突状结构.流式细胞术检测结果显示,imDC中表达CD1、MHC-Ⅱ的DC占比分别为(0.113±0.005)％、(0.430+0.016)％,低于 mDC 的(21.400±0.327)％、(21.333±0.450)％(t=130.341、92.906,均P＜0.05).TPx 组表达 MHC-Ⅱ、CD80、CD86 的 DC 占比分别 为(15.300±0.245)％、(22.900±0.374)％、(13.033±0.249)％,均低于 LPS 阳性对照组的(19.000±0.374)％、(31.600±0.082)％、(21.300± 0.245)％(t=11.53、46.32、43.84,均P＜0.05)和 ESA 组的(18.365±0.618)％、(40.400±0.356)％、(30.300±0.283)％](t=9.55、93.17、91.57,均P＜0.05);TPx 组表达 MHC-Ⅱ 的 DC 占比高于阴性对照组的(12.133±0.492)％(t=9.87,P＜0.05).ELISA检测结果显示,培养上清中,TPx组DC分泌IL-6水平为 15.682±0.660,低于阴性对照组的 21.041±0.901(t=6.51,P＜0.05);分泌 TNF-α、IL-6、IL-10 和 IL-12水平均低于 LPS 阳性对照组的 169.037±7.823、42.118±1.932、34.730±1.772、52.504±2.431(t=36.79、32.09、13.09、35.05,均P＜0.05);分泌 IL-12 水平低于 ESA 组的 23.854±1.020(t=6.93,P＜0.05).结论 TPx通过诱导DC表面MHC-Ⅱ高表达、CD80和CD86低表达,以及降低IL-6的分泌水平来介导免疫耐受.

关键词：猪囊尾蚴、排泄分泌抗原、硫氧还蛋白过氧化物酶、树突状细胞

所属期刊栏目：41

分类号：R383.34(医学寄生虫学)

在线出版日期：2023-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：286-293