氨基醇类化合物HT24对多房棘球蚴原头节微管蛋白表达水平的影响

摘要：

目的 探索氨基醇类化合物HT24对多房棘球蚴原头节微管蛋白表达水平的影响.方法 从感染多房棘球蚴的BALB/c小鼠体内分离原头节,体外培养1 d后分为对照组和低、中、高浓度组,分别加入终浓度0.5％的二甲基亚砜(DMSO)和25、50、100 μmol/L的HT24共培养,每组设3个平行孔,每孔含原头节约2 000个.HT24作用后第1～3天观察虫体活性及形态改变,第3天透射电镜下观察原头节焰细胞超微结构的变化情况,第3、5、7天实时荧光定量PCR(qPCR)检测原头节中α9-,β2-,β4-和β6-微管蛋白基因的mRNA相对转录水平,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测原头节中β-微管蛋白的相对表达量.组间比较使用双因素方差分析方法.结果 氨基醇类化合物HT24作用后第3天,低浓度组多房棘球蚴原头节轮廓模糊,虫体胀大,透明度降低,部分钩突脱落;中浓度组原头节明显胀大,钩突脱落;高浓度组原头节全部死亡,虫体缩小.透射电镜观察结果显示,中、高浓度组焰细胞胞膜破裂,胞质内纤毛断裂,出现大的缺口或断裂口,部分纤毛溢出,游离于细胞外.qPCR结果显示,相较于对照组(100),低、中、高浓度组第7天α9-微管蛋白基因mRNA相对转录水平分别为8.01±1.54、9.84±0.40和7.85±2.60,3组间差异有统计学意义(P＜0.01);β2-微管蛋白基因mRNA相对转录水平分别为10.97±0.69、11.83±0.97和6.48±1.52,3组间差异有统计学意义(P＜0.01);β4-微管蛋白基因mRNA相对转录水平分别为10.61±1.24、8.31±1.05和7.47±0.96,3组间差异有统计学意义(P＜0.01);β6-微管蛋白基因mRNA相对转录水平分别为8.83±0.80、7.89±1.30和5.63±2.25,3组间差异有统计学意义(P＜0.01).Western blotting分析结果显示,HT24作用后第3天低、中、高浓度组β-微管蛋白的相对表达量分别为0.36±0.06、0.23±0.03和0.61±0.06,均低于对照组(0.67±0.05)(P＜0.01);第5天分别为 1.12 土0.03,0.55±0.04,0.30±0.02,均高于对照组(0.26±0.03)(P＜0.01);第7天分别为0.73±0.05,0.36±0.04,0.40±0.04,其中中、高浓度组低于对照组(0.73±0.05)(P＜0.01).结论 氨基醇类化合物HT24能降低多房棘球蚴原头节微管蛋白基因mRNA和蛋白的表达水平,影响微管蛋白功能,从而抑制多房棘球蚴的生存.

关键词：多房棘球绦虫;氨基醇类化合物;原头节;微管蛋白

所属期刊栏目：39

分类号：R383.33(医学寄生虫学)

资助基金：上海市自然科学基金;寄生虫病所防治技术储备科研基金

在线出版日期：2021-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：437-442,448