丰宫并殖吸虫感染大鼠后诱导肺组织细胞自噬的初探

摘要：

目的 通过检测蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关因子的表达,探讨丰宫并殖吸虫感染大鼠是否可导致肺组织细胞发生自噬.方法 40只SD大鼠随机分为健康对照组,感染后3、7、14 d组,每组10只,感染组每鼠腹壁皮下注射6条丰宫并殖吸虫后尾蚴,分别在感染后3、7、14 d取各组大鼠血清和肺组织,ELISA检测血清中IL-1、IL-6水平.取肺组织用于透射电镜观察自噬体,HE染色观察肺组织病理学改变,蛋白质免疫印迹(Western blotting)和免疫组化检测Akt、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、程序性死亡受体-1(Beclin 1)及微管相关蛋白轻链3(LC3 Ⅱ)相关因子的蛋白表达.采用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析.结果 ELISA检测结果显示,感染后3、7、14 d组血清中IL-1水平分别为(1 558.0±123.6)、(1 511.0±213.1)和(1 448.0±176.8)pg/ml,均高于对照组的(1 222.0±112.8)pg/ml(P＜0.05);感染后3、7d 组 IL-6水平分别为(1 481.0±197.9)、(1 423.0±210.0)pg/ml,均高于对照组的(1 221.0±138.9)pg/ml(P＜0.05).透射电镜观察在不同的感染阶段,肺组织中线粒体均出现自噬现象.大鼠组织肺病理学检测结果显示,各感染组细胞排列紊乱,肺泡结构遭到不同程度的破坏.各感染组Akt蛋白表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);感染后3、7 d组磷酸化蛋白激酶B(p-Aktser473)蛋白表达水平为(1.288±0.109)、(1.619±0.132),均高于对照组(0.733±0.135)(P＜0.01);感染后3、7、14 d组磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTORser2448)蛋白表达水平分别为(1.574±0.278)、(2.384±0.125)和(1.808±0.121),均高于对照组(1.260±0.087)(P＜0.05);感染后3d 组 mTOR、Beclin 1 蛋白表达水平分别为(1.714±0.217)和(2.736±0.333),均高于对照组(1.345±0.067)和(1.974±0.225)(P＜0.01);感染后 14 d 组 LC3 Ⅱ 蛋白表达(1.938±0.191)高于对照组(1.401±0.200)(P＜0.01).免疫组化分析结果显示,对照组肺组织细胞呈蓝色,阳性呈棕黄色,各因子阳性定位于细胞膜和细胞浆.各感染组Akt、mTOR与对照组相比,肺组织细胞中棕黄色显色不明显,A450值与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);感染后3、7、14 d组p-Aktser473、p-mTORser2448及Beclin 1与对照组相比,棕黄色显色加深明显,A450值分别为(0.104±0.010)、(0.143±0.022)、(0.088±0.013),(0.100±0.007)、(0.151±0.006)、(0.120±0.012)和(0.129±0.005)、(0.047±0.004)、(0.050±0.005),均高于相应对照组(0.032±0.001)、(0.065±0.002)和(0.031±0.001)(P＜0.05);感染后3、14 d 组 LC3 Ⅱ 与对照组比较棕黄色明显加深,A450值分别为(0.056±0.006)、(0.120±0.007),均高于对照组(0.042±0.004)(P＜0.05).结论 丰宫并殖吸虫感染大鼠所致的肺损伤,炎症反应可诱导肺组织细胞发生自噬,该自噬作用可通过检测Akt/mTOR信号通路相关因子的表达来初步实现.

关键词：丰宫并殖吸虫、感染、大鼠、Akt/mTOR信号通路、肺组织细胞、自噬

所属期刊栏目：39

分类号：R383.23(医学寄生虫学)

资助基金：云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项;云南省地方本科高校基础研究联合专项基金项目;云南省教育厅科研项目;人才培养项目;人才培养项目

在线出版日期：2021-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：35-42