刚地弓形虫速殖子培养上清液对人胃癌细胞BGC-823增殖和凋亡的影响
目的 研究刚地弓形虫速殖子培养上清液对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响.方法 取对数生长期的人胃癌BGC-823细胞(5×104个/ml)接种于细胞培养瓶中,分别加入不同浓度弓形虫速殖子(2× 107/ml、4×107/ml和8×107/ml)培养24 h后的上清液,对照组加入等体积DMEM培养基.分别于培养24、48和72 h后使用CCK-8法检测BGC-823细胞增殖抑制率.于培养24 h后,加入Hoechst染料,荧光显微镜下观察细胞的凋亡情况,以及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡条带.流式细胞仪检测BGC-823细胞用弓形虫速殖子培养上清液培养24 h后的细胞周期,计算细胞增殖指数(PI),以及检测细胞凋亡相关蛋白p53和Bcl-2的表达情况. 结果 CCK-8法检测结果显示,弓形虫速殖子浓度越高,作用时间越长,其培养上清对BGC-823细胞的增殖抑制作用越明显,8×107/ml速殖子培养上清液培养细胞72 h后,抑制率达34.3％.荧光显微镜下可见,实验组出现凋亡小体,且凋亡小体的数量随速殖子浓度的升高而增加.琼脂糖凝胶电泳结果显示,4×107/ml和8×107/ml弓形虫速殖子培养上清液培养24 h后的细胞均出现凋亡条带.流式细胞仪检测细胞周期结果显示,随弓形虫速殖子浓度的增加,其培养上清液所培养的细胞G0/G1期比例升高,S期比例降低,PI值随之降低,8×107/ml组的细胞PI值为0.36,显著低于对照组(0.60)(P＜0.05).速殖子培养上清液培养的细胞p53蛋白表达量上升,Bcl-2蛋白表达量下降,与对照组差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 弓形虫速殖子培养上清能够抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖,并可能通过上调p53蛋白和下调Bcl-2蛋白表达,引起人胃癌BGC-823细胞的凋亡.
刚地弓形虫、胃癌细胞、细胞凋亡、p53、Bcl-2
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R382.5(医学寄生虫学)
河北省张家口市科技局资助课题No.0911021D-3Supported by the project of Zhangjiakou Municipal Science and Technology Bureau 0911021D-3
2014-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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