东方田鼠肺成纤维细胞的分离培养及其对日本血吸虫的杀伤作用
目的 探索和建立东方田鼠肺成纤维细胞体外分离、培养的技术方法,并观察其对日本血吸虫的杀伤作用. 方法 运用含15％小牛血清的Dulbecco改良Eagle培养液(DMEM)和RPMI 1640两种培养体系,采用组织块贴壁法和胰酶消化法,分别对出生后1、3和5d的东方田鼠乳鼠肺成纤维细胞(Microtus fortis lung fibroblasts,MfLF)进行原代分离、培养,倒置显微镜下观察MfLF形态和生长特性.第2代和第3代MfLF培养上清与日本血吸虫童虫共培养96 h,观察其对童虫的杀伤效果. 结果 实验发现,采用胰酶消化法培养,只有少量MLF细胞缓慢贴壁生长,而组织块贴壁法MfLF贴壁速度较快.不同日龄幼鼠的肺成纤维细胞采用组织块贴壁法培养,细胞活率和细胞纯度以1～3日龄乳鼠为最佳.在DMEM和RPMI 1640两种培养液中MfLF均可传代培养,两者无明显差异.MfLF体外只可传代4～5次.日本血吸虫童虫经第2代和第3代MfLF培养上清处理后,死亡率分别为9.5％和10.5％,与阴性对照(8.8％)比较差异无统计学意义(P＜0.05). 结论 提示组织块贴壁法适用于MfLF的体外培养,但MfLF培养上清对日本血吸虫童虫无明显杀伤效果.
东方田鼠、肺成纤维细胞、日本血吸虫
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R383.24(医学寄生虫学)
湖南省重点学科建设项目;湖南文理学院生命科学学院省级平台开放课题项目SKYPT201201;湖南文理学院科学研究一般项目300110301013;湖南文理学院博士科研启动基金资助10713101046
2013-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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