快速诊断多房棘球蚴病胶体金免疫层析试条方法的建立与评价
目的 建立快速、简便诊断多房棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法.方法 提取多房棘球蚴原头节总RNA,通过RT-PCR获得编码Em18基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白；采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗人IgG单克隆抗体；将重组Em18抗原包被于硝酸纤维素膜适当位置,制成检测特异抗体的胶体金免疫层析试条.用该试条检测多房棘球蚴病(56份)、细粒棘球蚴病(87份)、囊尾蚴病(30份)、日本血吸虫病(10份)和弓形虫病(10份)患者血清,以及健康人(50份)血清,以评价其检测的敏感性和特异性,同时用ELISA法进行平行检测,以评价该试条的诊断性能.结果 以重组蛋白Em18为抗原胶体金免疫层析试条检测多房棘球蚴病患者血清,敏感性为92.9％ (52/56).与细粒棘球蚴病和囊尾蚴病患者血清分别存在9.2％(8/87)和3.3％ (1/30)的交叉反应,与健康人血清存在8.0％( 4/50)的假阳性率,与日本血吸虫病和弓形虫病患者血清则无交叉反应,特异性为93.0％( 174/187).ELISA法检测的敏感性和特异性分别为94.6％ (54/56)和92％(172/187),与试条法比较两者差异均无统计学意义(P＞0.05).kappa分析结果显示,试条法与ELISA法检测多房棘球蚴病患者血清的结果高度一致(κ=0.98).结论 以重组Em18抗原建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测多房棘球蚴病的敏感性和特异性均较高.
多房棘球蚴病、重组Em18抗原、免疫层析试条、ELISA、诊断
30
R532.32(寄生虫病)
国家科技部重大专项2009ZX10004-201
2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
90-94
