日本血吸虫童虫表膜结合多肽的亲和筛选与初步鉴定

摘要：

目的 筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定.方法 利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进行测序.根据测序结果,选取出现次数最多的噬菌体克隆作为目标噬菌体,免疫组化检测目的 噬菌体,并回输到已感染日本血吸虫的小鼠体内,2.5 h后处死小鼠,回收肝脏和日本血吸虫童虫,分别洗脱与肝脏和童虫结合的噬菌体,进行统计学分析.结果 经3轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的0.77×10-8到第3轮的0.75×10-5,说明噬菌体得到了有效富集.DNA测序结果表明,20个噬菌体克隆中的15个克隆呈现QHPRIRKOOOOO序列.免疫组化结果显示,表达该序列的噬菌体能与童虫表膜有效结合;体内回输试验证实,该噬菌体能有效地靶向结合于体内日本血吸虫童虫表膜.结论 筛选获得的短肽QHPRIRKOOOOO能有效地靶向结合日本血吸虫童虫表膜.

关键词：日本血吸虫、童虫、噬菌体展示技术、表膜、靶向性

所属期刊栏目：28

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30570952;湖南省卫生厅2009

在线出版日期：2010-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：172-175