颗粒化日本血吸虫Mr 22 600抗原对小鼠树突状细胞和CD4+CD25+调节性T细胞的作用
目的 研究颗粒化日本血吸虫Mr 22 600抗原对小鼠树突状细胞(DCs)功能的影响及诱导CD4+CD25+调节性T细胞的作用.方法 体外实验:分别用Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原与可溶性rSj22.6/26GST抗原负载DCs,流式检测DCs表型变化,混合淋巴细胞增殖实验检测DCs功能.将不同抗原负载的DCs,与CD4+ T细胞共培养,流式检测观察对CD4+CD25+ Foxp3+ T细胞数量的影响.体内试验:将42只BALB/c小鼠随机分6组(每组6～8只),A组免疫Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原,B组免疫福氏佐剂乳化rSj22.6/26GST抗原,C组免疫rSj22.6/26GST抗原,同时设Sepharose 4B对照组(D组),福氏佐剂对照组(E组)和PBS对照组(F组),各组均为皮下多点免疫50 靏抗原,隔2周加强免疫,共免疫2次.末次免疫后2周处死,无菌取腹股沟淋巴结,制备细胞悬液,流式检测DCs占淋巴结细胞的比例; 同时取脾脏,制备成脾脏单个核细胞,流式检测各免疫组CD4+CD25+ Foxp3+ T细胞占脾细胞的比例.用免疫磁珠分选各免疫组CD4+CD25+ T细胞,与CD4+CD25- T细胞共培养,氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测细胞增殖情况.结果 体外实验结果显示,DCs经可溶性抗原刺激后表面分子CD40、CD80、CD86表达率分别为(43.5±6.2)%、(37.7±0.1)%和(71.4±1.4)%, 经Sepharose 4B偶联抗原刺激后表达率分别为(31.2±5.4)%、(32.0±1.6)%和(63.8±1.0)%, 与可溶性抗原相比,Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原不能有效刺激DCs成熟.Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原负载DCs可诱导CD4+CD25+ 调节性T细胞扩增.体内实验结果显示,Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原免疫小鼠可诱导CD4+CD25+ 调节性T细胞数量增加,且与可溶性抗原组(cpm值为3 558±147)相比,Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原组(cpm值为1 420±335)来源的CD4+CD25+ 调节性T细胞的抑制能力更强.结论 Sepharose 4B偶联rSj22.6/26GST抗原与可溶性抗原相比,更易诱导CD4+CD25+ 调节性T细胞,诱导的CD4+CD25+ 调节性T细胞具有更强的抑制功能,且这一作用可能与不同性状抗原干预DCs的功能状态有关.
日本血吸虫、CD4+CD25+T细胞、树突状细胞、颗粒抗原
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R383.24(医学寄生虫学)
国家自然科学基金30872205;江苏省自然科学基金BK2007228
2010-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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