细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白的免疫反应性
目的 利用基因工程方法表达细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白(rAgB),并分析其免疫反应性.方法 将rAgB基因片段插入原核表达载体pET41a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,经异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得重组蛋白rAgB-GST.用谷胱甘肽琼脂糖树脂亲和层析柱(GST-sepharose 4B)纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况.用蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫反应性,并用免疫胶体金包虫诊断试剂盒作为对照.结果 PCR、舣酶切及DNA测序结果均显示重组质粒pET41a-rAgB构建成功.SDS-PAGE结果表明,重组蛋白rAgB-GST的相对分子质量(Mr)为40 800,纯化蛋白含量为78.4%.Western blotting分析结果显示.重组蛋白rAgB-GST检测细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清的阳性率分别为79.2%(95/120)和51.1%(23/45),但与卫氏并殖吸虫病患者、华支睾吸虫病患者血清以及健康人血清反应均为阴性.rAgB-GST的敏感性和特异性分别为79.2%(95/120)和81.0%(98/121),均略高于免疫胶体金棘球蚴病诊断试剂盒的敏感性(72.8%,75/103)和特异性(76.9%,30/39).结论 重组rAgB-GST蛋白可被细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清识别,有较好的免疫反应性.
细粒棘球绦虫、重组抗原B、免疫诊断
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R532.32(寄生虫病)
国家高技术研究发展计划863计划2007AA02ZA11;新疆维吾尔自治区重点实验室开放课题XJDX0202-2006-05;XJDX0202-2003-05
2009-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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