华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基基因的克隆表达和重组蛋白的免疫原性分析

摘要：

目的 对华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基(CsF0-ATP-synt_B)基因进行克隆、表达及重组蛋白的免疫原性分析.方法 以华支睾吸虫成虫cDNA文库中含有F0-ATP合酶b亚基基因的质粒为模板,扩增该基因(去除线粒体靶向序列的成熟肽基因),将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经亲和层析获得的纯化表达产物免疫SD大鼠,制备抗血清.蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫原性.结果 华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基成熟肽基因的编码区含813个碱基,编码271个氨基酸,相对分子质量(Mr)为31 171.9.经亲和层析获得的重组蛋白可被其免疫的大鼠血清识别.结论 华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基基因可在原核表达系统中获得具有免疫原性的高效表达.

关键词：华支睾吸虫、F0-ATP合酶b亚基、基因克隆、原核表达、免疫原性

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分类号：R383.22(医学寄生虫学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AA02Z422;广东省重大科技专项基金2004A30801004;广东省广州市科技计划2006Z3-E4011

在线出版日期：2008-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：390-393