猪带绦虫TSO45W-4BX与猪CD58分子在大肠埃希菌中的联合表达

摘要：

目的 以猪CD58为分子佐剂,将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达,寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗.方法 分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板,PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因,将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4T-1定向连接,转化大肠埃希菌JM109,重组质粒经鉴定正确后,在其下游酶切插入CD58基因,PCR扩增和测序证明阅读框正确后,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE))和蛋白质印迹法(Western blotting)分析表达产物的免疫活性.结果 pGEX-4BX和pGEX-4BX/CD58分别表达Mr 41 000和Mr 69 000的融合蛋白,pGEX-4BX表达产物主要以可溶性形式存在,而pGEX-4BX/CD58却以包涵体形式存在,但两者都能被囊尾蚴病患者血清识别.结论 TSO45W-4BX与CD58基因联合表达,TSO45W-4BX仍具有免疫活性.

关键词：猪带绦虫、TSO45W-4BX、CD58、联合表达

所属期刊栏目：24

分类号：R532.331;R392.11(寄生虫病)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999011906

在线出版日期：2006-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：285-289