10.3969/j.issn.1000-7423.2005.04.012
旋毛虫Ts87抗原基因在毕赤酵母中的构建及表达
目的构建旋毛虫Ts87抗原基因并在毕赤酵母中分泌表达.方法 通过PCR特异性扩增Ts87抗原基因,构建重组质粒PPICZαA-Ts87.其线性化后,转化毕赤酵母GS115,抗生素Zeocin 筛选高抗性转化子,PCR筛选阳性重组菌株.表型鉴定后进行甲醇诱导表达,收集培养不同天数的上清液.斑点杂交法分析上清液以确定有无重组蛋白分泌表达.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析鉴定表达蛋白.结果与结论 成功构建了PPICZαA-Ts87毕赤酵母表达重组质粒,确定了Ts87抗原基因在毕赤酵母中获得分泌表达.
旋毛虫、蠕虫基因、毕赤酵母菌、基因表达
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R532.14;R392.11(寄生虫病)
美国中华医学会资助项目CMBParasitology 98-674;北京市教委科技发展计划项目01KJ-091;北京市跨世纪人才工程基金2001-2004;首都医科大学校科研和教改项目2002-2005
2005-10-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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