卫氏并殖吸虫基因片段的克隆与鉴定

摘要：

目的从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆.方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小.序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆人表达载体pRESETB,并转化大肠杆菌BL-21细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定.结果所筛选的阳性克隆插入片段约800 bp.DNA序列分析显示其为编码半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L的基因序列.Pw-2重组子特异性表达产物约为32 kDa,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异地识别.结论从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库筛选的重组质粒Pw-2编码属于半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L.

关键词：卫氏并殖吸虫、cDNA文库、重组蛋白

所属期刊栏目：21

分类号：R383.232(医学寄生虫学)

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：144-146