幽门螺杆菌东、西方株CagA的结构差异及其基因表达研究

摘要：

目的 比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东、西方株CagA蛋白的结构差异,探讨其致病性差异的原因. 方法 微需氧培养Hp东、西方株各3株,获取cagA全长序列,用DNA Star和MEGA6进行氨基酸序列和构成比对.PT-PCR和Western blot检测东、两方株中CagA和尿素酶及其基因的表达.RT-qPCR检测东、西方株中8个基因的表达并进行分析. 结果 成功培养并鉴定Hp临床株4株,3株为东方株,1株为西方株.序列比对分析东、西方株中CagA氨基酸全长序列有明显差异.丙氨酸、精氨酸和苏氨酸在东方株中显著高于两方株:分别为88和83(t=5.303,P=0.006)、32和25(t=3.528,P=0.025)、57和50(t=3.951,P=0.017);组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺和缬氨酸在东方株显著低于西方株:分别为13和1 7(t=8.485,P=0.001)、1 37和147(t=11.72,P=0.000)、12和20(t=9.449,P=0.001)、59和63(t=4.472,P=0.011)、59和63(t=6.5,P=0.003).尿素酶α基因在6株Hp中均有表达,但有2株Hp不表达CagA和尿素酶β.定量PCR结果显示,东方株尿素酶α基因、LPS合成蛋白基因及鞭毛钩蛋白FlgE基因高表达,而西方株中尿素酶辅助蛋白Ureh基因、鞭毛合成蛋白 FlhA基因及膜蛋白基因高表达(P＜0.05).结论 Hp东、西方株在CagA结构及基因表达存在差异性,推测可能是Hp东方株致病性更强的原因之一.

关键词：幽门螺杆菌、分离鉴定、CagA、尿素酶

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分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31660031;贵州省科技计划项目黔科合平台人才项目”2017”5652;贵阳市科技计划项目筑科合同项目20175-16;贵阳市科技计划项目20161001

在线出版日期：2018-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1067-1072