分枝杆菌噬菌体D29 holin基因的克隆及其编码蛋白的生物信息学分析

摘要：

目的 研究分枝杆菌噬菌体D29 holin基因编码蛋白的理化特点及生物学特性,分析噬菌体抗结核菌的潜力.方法 根据GenBank中登录的分枝杆菌噬菌体D29 holin基因序列设计上、下游引物,以分枝杆菌噬菌体D29基因组为模板,PCR扩增holin基因,构建重组质粒pET32a-holin,进行双酶切鉴定、测序鉴定及生物信息学分析. 结果 PCR扩增得到序列正确的holin基因产物并成功构建重组质粒pET32a-holin.进化分析显示分枝杆菌噬菌体D29 holin基因与已知有尾分枝杆菌噬菌体Chy1、Chy4、Chy5 holin基因亲缘关系较近.生物信息学分析显示,该基因编码Holin蛋白为稳定、疏水性蛋白,具有2个跨膜区域和亲水性C-端;二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主,有信号肽,蛋白序列中存在2个丝氨酸磷酸化位点. 结论 分枝杆菌噬菌体D29 Holin蛋白的两个跨膜区及亲水性C-端构象发生变化,有助于阐明Holin“定时”打孔及启动噬菌体裂解细菌的机制,为研发抗结核Holin多肽药物奠定了基础.

关键词：分枝杆菌、噬菌体、D29、holin基因、生物信息学分析

所属期刊栏目：11

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;山东省自然科学基金

在线出版日期：2016-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：775-778